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Streptavidin, AF405 conjugate,AF405标记的链霉亲和素
发布时间:2025-12-02     作者:HLL   分享到:

产品名称:Streptavidin, AF405 conjugate,AF405标记的链霉亲和素

AF405 标记的链霉亲和素是蓝色荧光探针,由 Alexa Fluor 405(AF405)荧光染料与链霉亲和素(Streptavidin)共价偶联而成。链霉亲和素是分子量约 66 kDa 的四聚体蛋白,每个亚基可与生物素以极高亲和力(Kd≈10⁻¹⁵ M)特异性结合,且结合速度快、稳定性强,是生物医学研究中亲和识别与信号放大的核心工具;AF405 是近紫外激发的蓝色荧光染料,最大激发波长约 405 nm,最大发射波长约 442 nm,具有荧光量子产率高、光稳定性强、pH 适用范围广(pH 4-10)、对蛋白质活性影响极小等优势,其荧光信号与常用的绿色、红色荧光染料光谱重叠度低,是多色荧光成像的理想选择。

该探针的核心优势在于特异性与兼容性的完美结合:链霉亲和素的四价结合能力可实现信号放大,提高检测灵敏度,而 AF405 的蓝色荧光特性使其能与其他荧光探针(如 AF488、AF568)组合使用,实现多种靶标的同步检测。标记过程采用温和的酰胺化反应,通过 AF405 的 NHS 酯基团与链霉亲和素分子中赖氨酸残基的氨基结合,不影响链霉亲和素与生物素的结合位点,确保亲和活性不受损失。

制备过程严格控制以保证探针质量:首先通过离子交换层析或亲和层析纯化链霉亲和素,确保纯度≥98%,去除杂蛋白干扰;将 AF405 染料活化生成 NHS 酯衍生物,与纯化后的链霉亲和素在 pH 7.4 的碳酸氢钠缓冲液中反应,控制染料与链霉亲和素的摩尔比为 3:1-5:1,室温避光反应 2-3 小时,避免过度标记导致蛋白聚集或活性下降;反应后通过凝胶过滤层析(如 Sephadex G-25)去除游离染料,收集目标产物,经紫外 - 可见光谱检测标记率(通常为 2-4 个染料分子 / 个链霉亲和素分子),生物素结合活性实验验证其结合能力保持在 90% 以上。

应用场景广泛覆盖多色成像、流式细胞术、免疫检测等领域:在多色免疫荧光染色中,与生物素标记的一抗或二抗结合,用于细胞或组织中低表达抗原的定位,蓝色荧光信号清晰,背景干扰低,可与其他颜色探针实现多靶标共定位分析;在流式细胞术中,通过 405 nm 激光激发,标记生物素化的细胞表面标志物抗体,实现细胞的精准分选和定量分析,尤其适用于稀有细胞(如循环肿瘤细胞)的检测;在生物传感器构建中,固定于载体表面,通过生物素 - 链霉亲和素系统实现靶标的高特异性捕获与信号检测;在核酸检测中,与生物素化的探针结合,用于基因芯片、原位杂交实验,辅助基因表达分析。储存时需密封置于 - 20℃避光冷冻保存,避免反复冻融和强光照射,防止蛋白质变性或荧光淬灭,使用前用 PBS 缓冲液稀释至工作浓度,避光孵育以保证荧光稳定性。

产地:西安

规格:50mg 100mg 500mg

纯度:95%

状态:固体/粉末

储藏条件:冷藏

温馨提示:仅用于科研,不能用于人体实验!

西安齐岳生物科技有限公司是一家集研发,生产,销售为一体的高科技企业,可提供合成磷脂、高分子聚乙二醇衍生物、嵌段共聚物、顺磁/超顺磁性纳米颗粒、纳米金及纳米金棒、近红外荧光染料、活性荧光染料、荧光标记的葡聚糖BSA和链霉亲和素、蛋白交联剂、小分子PEG衍生物、点击化学产品、树枝状聚合物、环糊精衍生物、大环配体类、荧光量子点、透明质酸衍生物、石墨烯或氧化石墨烯、碳纳米管、富勒烯等等,可以满足不同客户的定制需求。

AF405标记的链霉亲和素

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小编:HLL 2025年12月1日

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