产品名称:Cy3-WGA,Cy3标记的小麦胚芽凝集素
Cy3 标记的小麦胚芽凝集素是红色荧光探针,由 Cy3 荧光染料与小麦胚芽凝集素(WGA)共价连接而成。WGA 是从小麦胚芽中提取的凝集素,分子量约 36 kDa,能特异性识别并结合细胞表面的 N - 乙酰葡糖胺(GlcNAc)和唾液酸残基,这些糖基广泛分布于上皮细胞、肿瘤细胞、免疫细胞等细胞膜表面的糖蛋白和糖脂中,是细胞识别、黏附的重要分子基础;Cy3 是经典的红色荧光染料,最大激发波长约 550 nm,最大发射波长约 570 nm,具有荧光亮度高、光稳定性强、荧光量子产率高、与常用荧光设备兼容性好等优势,其红色荧光信号受生物组织自发荧光干扰小,适合常规荧光成像和多色实验。
该探针的核心优势在于靶向性与荧光性能的协同:WGA 的高特异性确保了探针仅结合表达靶标糖基的细胞或组织,减少非特异性背景;Cy3 的荧光信号明亮,易于检测,且激发和发射光谱与常用荧光显微镜、流式细胞仪的滤光片匹配,使用便捷。标记过程采用温和的化学偶联方法,通过 Cy3 的 NHS 酯或异硫氰酸酯基团与 WGA 的氨基反应,在不破坏 WGA 凝集素活性的前提下,实现染料与蛋白的稳定连接。
制备流程包括 WGA 纯化、Cy3 活化、偶联与纯化:首先从小麦胚芽中通过硫酸铵分级沉淀、透析、凝胶过滤层析等步骤纯化 WGA,获得高纯度(≥95%)的蛋白;将 Cy3 染料溶解于无水 DMF 中活化,使其能与 WGA 分子中的赖氨酸残基氨基发生共价结合;偶联反应在 pH 7.2-7.4 的 PBS 缓冲液中进行,控制染料与 WGA 的摩尔比为 4:1-6:1,室温避光反应 3-4 小时;反应结束后,通过凝胶过滤层析(如 Sephadex G-25)去除未结合的游离染料,收集目标产物,经 HPLC 检测纯度≥95%,荧光光谱验证标记率(通常为 3-5 个 Cy3 分子 / 个 WGA 分子),凝集素活性检测确认其结合能力未受显著影响。
应用场景涵盖细胞生物学、病理学、免疫学等研究领域:在细胞成像中,用于标记细胞膜表面糖基,清晰观察细胞的形态、分布和运动轨迹,尤其适用于上皮细胞、肿瘤细胞的识别和定位;在组织切片染色中,用于病理切片中特定组织(如肿瘤组织、上皮组织)的标记,红色荧光能清晰展示细胞分布特征,辅助疾病诊断;在多色荧光成像中,与绿色荧光探针(如 FITC 标记的抗体)组合使用,实现细胞膜糖基与其他抗原的共定位分析;在流式细胞术中,用于定量检测细胞表面糖基的表达水平,分析细胞的分化状态或病理改变;在微生物检测中,WGA 可结合细菌、真菌表面的糖基结构,实现微生物的荧光标记和计数。储存时需密封置于 - 20℃避光冷冻保存,避免反复冻融和强光照射,防止蛋白质变性或荧光淬灭,使用前用 PBS 缓冲液稀释至工作浓度(1-10 μg/mL),避光孵育 15-30 分钟即可。
产地:西安
规格:50mg 100mg 500mg
纯度:95%
状态:固体/粉末
储藏条件:冷藏
温馨提示:仅用于科研,不能用于人体实验!
西安齐岳生物科技有限公司是一家集研发,生产,销售为一体的高科技企业,可提供合成磷脂、高分子聚乙二醇衍生物、嵌段共聚物、顺磁/超顺磁性纳米颗粒、纳米金及纳米金棒、近红外荧光染料、活性荧光染料、荧光标记的葡聚糖BSA和链霉亲和素、蛋白交联剂、小分子PEG衍生物、点击化学产品、树枝状聚合物、环糊精衍生物、大环配体类、荧光量子点、透明质酸衍生物、石墨烯或氧化石墨烯、碳纳米管、富勒烯等等,可以满足不同客户的定制需求。

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小编:HLL 2025年12月1日




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