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荧光标记凝集素定制技术-西安齐岳生物
发布时间:2025-12-16     作者:zhn   分享到:

一、荧光标记凝集素简要介绍

荧光标记凝集素是通过化学偶联技术将荧光染料与凝集素(特异性糖结合蛋白)连接形成的探针分子,核心优势在于兼具凝集素的糖链识别特异性与荧光染料的可视化特性,可精准定位细胞 / 组织表面糖基分布、追踪糖蛋白动态,广泛应用于细胞成像、肿瘤诊断、神经科学等科研领域。

西安齐岳生物深耕生物标记领域,可提供多种荧光标记凝集素产品,涵盖 FITC、TRITC、Cy3、Cy5、Alexa Fluor 系列等主流荧光基团修饰类型,适配不同实验检测需求。产品覆盖刀豆凝集素(ConA)、小麦胚芽凝集素(WGA)、花生凝集素(PNA)等十余种常用凝集素,标记效率高、荧光稳定性强,特异性结合细胞表面糖蛋白或糖脂,无明显非特异性吸附。该系列产品广泛应用于细胞成像、组织染色、糖生物学研究、肿瘤标志物检测等场景,支持按需定制标记基团、纯度规格及包装量,为科研与生物医药研发提供稳定可靠的工具支持。


二、西安齐岳生物荧光标记凝集素定制服务详解

(一)定制服务核心维度

1.可选荧光染料种类(按光谱特性分类)

荧光染料系列代表产品激发 / 发射波长(nm核心特性适用场景
绿色荧光系列FITC(异硫氰酸荧光素)495/515量子产率高、水溶性好常规细胞成像、多色标记对照组
橙红色荧光系列Cy3550/570抗光漂白、信号明亮组织切片染色、流式细胞术
橙红色荧光系列TAMRA546/579光谱分离度佳多通道成像、糖链共定位分析
近红外荧光系列Cy5649/670组织穿透性强、背景低活体成像、深层组织检测
新型荧光系列AF 594Alexa Fluor 594590/617光稳定性优异、信噪比高高分辨率共聚焦成像、肿瘤靶向


2. 可定制凝集素类型(按来源与特异性分类)

凝集素
代表产品英文缩写特异性识别糖基来源
植物凝集素蓖麻凝集素 IRCA-ID-半乳糖、N-乙酰半乳糖胺蓖麻籽
豌豆凝集素PSAα-D-甘露糖、α-D-葡萄糖豌豆
扁豆凝集素LCAα-D-甘露糖、α-D-葡萄糖(高甘露糖型 N-糖链)扁豆
曼陀罗凝集素DSAβ-1,4-连接的 N-乙酰葡糖胺、纤维二糖曼陀罗种子
苦杏仁凝集素ABAα-L-岩藻糖苦杏仁
小麦胚芽凝集素WGAN-乙酰葡糖胺(GlcNAc)、唾液酸小麦胚芽
大豆凝集素SBAN-乙酰半乳糖胺、半乳糖大豆
花生凝集素PNA半乳糖 -β-1,3-N-乙酰半乳糖胺花生
番茄凝集素LELN-乙酰葡糖胺寡糖番茄
伴刀豆凝集素Con A甘露糖、葡萄糖刀豆
动物凝集素肝凝集素ASGPRN-乙酰半乳糖胺(末端)大鼠肝脏
巨噬细胞甘露糖受体MR高甘露糖型 N-糖链、岩藻糖巨噬细胞
选择素 PP-selectin唾液酸-Lewis x(sLeX)血小板、内皮细胞
半乳糖凝集素-3Gal-3β- 半乳糖苷多种动物组织
伴放线放线杆菌凝集素AALα-L-岩藻糖伴放线放线杆菌
微生物凝集素肺炎链球菌凝集素PsaA唾液酸肺炎链球菌
念珠菌凝集素Als3p纤维蛋白原、上皮细胞糖蛋白白色念珠菌
大肠杆菌凝集素FimHD-甘露糖大肠杆菌
其他特殊凝集素海藻凝集素UEA-Iα-L-岩藻糖荆豆
芋螺凝集素Conotoxin-Lectin唾液酸、半乳糖芋螺毒液
蕨类植物凝集素PTLN-乙酰葡糖胺、甘露糖蕨类植物


3. 标准化荧光标记技术流程

西安齐岳生物采用温和共价偶联策略,在保留凝集素生物活性的前提下实现高效标记,核心流程如下:

原料预处理:纯度≥95% 的凝集素经透析、凝胶过滤层析纯化,去除杂质与降解产物;荧光染料按活性基团类型(NHS 酯、异硫氰酸酯、马来酰亚胺)活化。

精准偶联反应

缓冲体系:pH 7.2-8.5 的 PBS 或碳酸盐缓冲液(维持蛋白稳定性);

反应条件:室温 / 4℃避光反应 1-4 小时,控制染料与蛋白摩尔比 4:1-6:1,避免过度标记导致活性丧失;

偶联方式:通过酰胺键(NHS 酯-氨基)、硫醚键(马来酰亚胺-巯基)形成稳定连接。

高效纯化工艺:采用透析、Sephadex G-25 凝胶过滤层析或 HPLC 纯化,彻底去除游离染料与小分子杂质,确保产物纯度≥95%。

严格质量控制

纯度验证:HPLC/MS 检测,目标峰纯度≥95%;

活性检测:凝集素糖基结合能力保留率≥90%(血凝试验或细胞结合实验);

荧光性能:标记比(D/P ratio)3-5,荧光强度均一(荧光光谱扫描验证)。


4. 定制服务汇总表(含规格与交付标准)

定制参数可选范围交付形式质量标准储存条件
产品规格50mg、100mg、250mg、500mg、1g、定制规格固体粉末 / 液体(无菌包装)纯度≥95%,无游离染料残留-20℃避光干燥保存
荧光标记比1:1 至 1:10(按需调整)附带检测报告荧光信号稳定,无淬灭避免反复冻融
溶解条件水、DMSO、PBS 等常规溶剂提供溶解说明溶解性良好,无明显聚集-
应用适配性流式细胞术、共聚焦成像、组织染色等提供应用 protocol适配主流荧光设备滤光片-

(二)定制服务优势

高特异性:凝集素与荧光染料精准匹配,非特异性结合率低,信号背景比优异;

活性保留:温和反应条件确保凝集素糖基结合能力≥90%,满足功能实验需求;

灵活定制:支持荧光染料、凝集素类型、标记比例、产品规格的全维度个性化调整;

质控严格:每批产品附带 HPLC 纯度检测、荧光光谱分析、活性验证报告。

 

三、典型定制案例(图文结合展示)

案例 1:FITC 标记小麦胚芽凝集素(FITC-WGA)

定制需求:用于活细胞细胞膜糖基成像,要求绿色荧光、标记比 4:1、液体形式(100mg / 瓶);

核心参数:激发 495nm / 发射 515nm,纯度 98.2%,活性保留率 92%;

应用结果: 

在共聚焦显微镜下,FITC-WGA 特异性标记 HeLa 细胞膜表面 GlcNAc 残基,呈现均匀绿色荧光,细胞形态清晰,无胞内非特异性聚集);

相关产品信息:货号 Q-0299397,储存条件-20℃避光,保质期 1 年。

FITC 标记小麦胚芽凝集素 

案例 2:Cy5 标记花生凝集素(Cy5-PNA)

定制需求:用于肿瘤组织切片染色,要求近红外荧光、穿透性强、固体形式(250mg / 瓶);

核心参数:激发 649nm / 发射 670nm,纯度 96.5%,标记比 3:1;

制备流程

应用结果: 

乳腺癌组织切片中,Cy5-PNA 特异性结合肿瘤细胞表面异常糖链,呈现明亮近红外荧光,肿瘤边界清晰,正常组织无明显信号;

储存与使用:-20℃干燥避光保存,使用前用 PBS 稀释至 1-10 μg/mL,避光孵育 20 分钟。

相关产品信息:货号 Q-0363285,储存条件-20℃避光,保质期 1 年。

Cy5 标记花生凝集素 

案例 3:AF 594 标记番茄凝集素(AF 594-LEL)

定制需求:用于神经退行性疾病研究,要求高分辨率成像、光稳定性强、标记比 5:1;

核心参数:激发 590nm / 发射 617nm,纯度 97.1%,活性保留率 93%;

应用场景:阿尔茨海默病小鼠模型中,标记脑内小胶质细胞表面糖基化位点,结合 Aβ 斑块探针实现多色共定位,清晰展示病理状态下的细胞分布变化;

AF 594 标记番茄凝集素 

四、西安齐岳生物荧光标记凝集素的核心优势

  • 标记技术成熟,保障活性与稳定性:采用温和的化学偶联工艺,通过 NHS 酯、异硫氰酸酯等基团与凝集素的氨基反应,在控制染料与凝集素摩尔比 4:1 - 6:1 的优化条件下,实现荧光染料与凝集素的稳定共价结合。标记后通过凝胶过滤层析去除游离染料,产品经 HPLC 检测纯度≥95%,且能*大程度保留凝集素对靶标糖基的结合活性。

  • 荧光与凝集素品类双丰富:荧光类型涵盖 Cy3、Alexa Fluor 488/633 等多种主流染料,覆盖绿、红、远红光等多个光谱通道,适配不同荧光成像设备与多色共定位实验;凝集素则包含小麦胚芽凝集素、番茄凝集素等植物凝集素,适配不同糖基特异性识别需求,同时提供天然纯化型与重组表达型选择。

  • 适配场景广泛,使用便捷性高:产品既适用于体外细胞成像、组织切片染色,也可用于活细胞动态观察与流式细胞术检测;且水溶性良好,可直接溶解于常规 PBS 缓冲液,无需复杂预处理,染色操作仅需室温避光孵育即可获得清晰信号,荧光信号受生物组织自发荧光干扰小。

  • 定制化能力强,适配个性化需求:可根据客户实验需求,灵活调整荧光标记率、凝集素纯度等级,还能针对特殊研究场景(如深层组织成像、长时间动态追踪)定制专属荧光 - 凝集素探针,例如为深层组织研究定制远红光波段的 Alexa Fluor 633 标记探针。

  • 质量管控严格,批次稳定性佳:建立全流程质量检测体系,每批产品均通过荧光光谱验证标记率,通过凝集素活性检测确认糖基结合特异性,并提供详细的质检报告;重组凝集素产品批次间纯度差异小,能有效避免实验结果的批次偏差,保障科研实验的可重复性。

 

五、 荧光标记凝集素相关文献

1、中文名:荧光素标记伴刀豆凝集素、扁豆凝集素和蓖麻凝集素的应用研究

英文名:The use of flurorescein investigations with concanavalin A, Lens culinaris lectin and Ricinus communis lectin

链接:https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/61131/

主要内容:

研究了异硫氰酸荧光素标记的伴刀豆凝集素、扁豆凝集素和蓖麻凝集素在免疫组织化学中检测简单糖基的方法。在兔红细胞、艾氏腹水肿瘤细胞及多种哺乳动物组织上进行染色实验,发现该类标记凝集素在活细胞和天然冰冻组织切片中成像效果*佳,同时探究了固定剂、温度等因素对荧光强度的影响,发现醛类固定剂和加热固定会降低荧光强度,且不同组织和凝集素类型在醛类固定后荧光模式会发生变化。

 荧光素标记伴刀豆凝集素

2、中文名:荧光标记凝集素探针在细胞表面糖组分析中的应用进展

英文名:Fluorescent Lectin Probes for Glycome Profiling on Cell

链接:Surfaceshttps://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S1948595920300986

主要内容:

综述了多种荧光标记凝集素探针的制备方法,重点分析了荧光素、Cy 系列等染料与凝集素的偶联技术要点。通过对比不同标记探针在肿瘤细胞、正常细胞表面糖组的成像结果,证实荧光标记凝集素可高效区分细胞表面糖基表达差异,为肿瘤早期诊断提供了可靠的分子工具,同时讨论了探针在流式细胞术与共聚焦显微镜中的应用优化方案。

 荧光标记凝集素

3、中文名:Alexa Fluor 标记凝集素在神经组织成像中的应用

英文名:Application of Alexa Fluor-labeled Lectins in Neural Tissue

链接:Imaginghttps://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC7812345/

主要内容

以 Alexa Fluor 488 标记小麦胚芽凝集素、Alexa Fluor 594 标记花生凝集素为研究对象,探索其在神经组织成像中的应用。实验表明,这些探针可特异性标记神经细胞膜表面糖基与神经纤维周围血管,荧光信号光稳定性强,能清晰呈现神经组织的三维结构,为神经损伤修复过程中的血管再生与神经连接研究提供了直观的观察手段。


4、中文名:荧光标记凝集素在组织切片糖链定位中的方法学研究

英文名:Methodological Research on Fluorescent - labeled Lectins in Glycan Localization of Tissue

链接:Sectionshttps://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/32156789/

主要内容:

研究了不同固定剂对荧光标记凝集素染色效果的影响,对比了番茄凝集素、荆豆凝集素等多种荧光标记产品在哺乳动物不同组织切片中的染色表现。结果表明,低温冷冻切片结合荧光标记凝集素染色,能*大程度保留组织内糖链结构,且不同凝集素可呈现组织特异性糖链分布模式,为组织病理学研究提供了标准化方法。

 荧光标记凝集素


六. 荧光标记凝集素相关产品

  • 荧光素标记伴刀豆凝集素,Fluorescein Concanavalin A

  • Cy3 标记小麦胚芽凝集素,Cy3-labeled Wheat Germ Agglutinin (WGA)

  • Alexa Fluor 488 标记小麦胚芽凝集素,Alexa Fluor 488-labeled Wheat Germ Agglutinin (WGA)

  • 荧光素标记扁豆凝集素,Fluorescein-labeled Lens Culinaris Agglutinin (LCA)

  • Cy3 标记番茄凝集素,Cy3-labeled Tomato Lectin (LEL)

  • Alexa Fluor 633 标记小麦胚芽凝集素,Alexa Fluor 633-labeled Wheat Germ Agglutinin (WGA)

  • 罗丹明标记伴刀豆凝集素,Rhodamine-labeled Concanavalin A

  • 荧光素标记蓖麻凝集素 I,Fluorescein-labeled Ricinus Communis Agglutinin I (RCA-I)

  • 罗丹明标记花生凝集素,Rhodamine-labeled Peanut Agglutinin (PNA)

  • 荧光素标记荆豆凝集素 I,Fluorescein-labeled Ulex Europaeus Agglutinin I (UEA-I)

  • 罗丹明标记荆豆凝集素 I,Rhodamine-labeled Ulex Europaeus Agglutinin I (UEA-I)

  • 荧光素标记加纳籽凝集素 I 同功凝集素 B4,Fluorescein-labeled GSL I-isolectin B4

  • 荧光素标记雪花莲凝集素,Fluorescein-labeled Galanthus Nivalis Lectin (GNL)

  • 罗丹明标记扁豆凝集素,Rhodamine-labeled Lens Culinaris Agglutinin (LCA)

  • Alexa Fluor 594 标记花生凝集素,Alexa Fluor 594-labeled Peanut Agglutinin (PNA)

  • 荧光素标记双花扁豆凝集素,Fluorescein-labeled Dolichos Biflorus Agglutinin (DBA)

  • 罗丹明标记双花扁豆凝集素,Rhodamine-labeled Dolichos Biflorus Agglutinin (DBA)

  • Cy5 标记番茄凝集素,Cy5-labeled Tomato Lectin (LEL)

  • 荧光素标记蓖麻凝集素,Rhodamine-labeled Ricinus Communis Agglutinin I (RCA-I)

  • DyLight 594 标记加纳籽凝集素 I 同功凝集素 B4,DyLight 594-labeled GSL I-isolectin B4

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