名称:5'-荧光素氨基磷酸酯
用途:科研
状态:固体/粉末/溶液
保存:冷藏
供应:西安齐岳生物科技有限公司

5'-荧光素氨基磷酸酯(Fluorescein-5'-phosphate amine,简称 FITC 标记荧光染料)是一类广泛应用于分子生物学和细胞生物学研究的荧光探针。FITC(Fluorescein Isothiocyanate)是一种基于荧光素(Fluorescein)的绿色荧光染料,通过氨基磷酸酯化学修饰,使其能够与多种生物分子实现共价连接,同时保留荧光素的优异光学性能。5'-位置的氨基磷酸酯修饰,使其特别适用于寡核苷酸和核酸探针的标记,以及酶活性研究和分子成像实验。
应用领域
核酸标记与检测
5'-荧光素氨基磷酸酯常用于寡核苷酸探针标记,例如荧光原位杂交(FISH)、实时 PCR(qPCR)和核酸微阵列(DNA microarray)实验。氨基磷酸酯可与寡核苷酸末端的羧基或活化基团形成稳定共价键,实现高效标记。
蛋白质标记与偶联
FITC 可通过氨基磷酸酯与蛋白质的活化羧基反应,标记抗体、酶或其他蛋白质分子,用于免疫荧光、Western blot 和 ELISA 分析。
酶活性检测
氨基磷酸酯结构可作为底物修饰点,用于磷酸酶或其他酶活性检测实验。当酶作用切除磷酸酯时,荧光信号会发生变化,实现动态监测。
细胞和活体成像
FITC 标记分子可进入细胞或结合细胞表面靶分子,实现荧光显微成像。其绿色荧光适用于多色成像,与红色荧光染料联合使用,可进行共定位研究。
使用注意事项
光敏性:FITC 易光漂白,操作和储存需避光。
溶液保存:建议在 pH 7–8 的缓冲液中低温保存,避免高温和强光照射。
偶联反应:氨基磷酸酯需要与活化羧基或其他活性基团反应,常用 EDC/NHS 化学方法实现蛋白或核酸偶联。
实验优化:在多色实验中注意荧光谱重叠,避免信号串扰。
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