CY5-NADH 花青素CY5-还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸的优势与特点-UDP糖丨MOF丨金属有机框架丨聚集诱导发光丨荧光标记推荐西安齐岳生物

CY5-NADH 是一种将荧光染料 CY5（Cyanine5）与还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NADH）偶联的化合物，是研究细胞代谢、能量转换及氧化还原反应的重要工具。NADH 是生物体内关键的辅酶之一，广泛参与细胞内的氧化还原反应、能量代谢以及电子传递链过程。在实验研究中，将 NADH 与 CY5 偶联，不仅保留了 NADH 的生物化学活性，还赋予其可检测的荧光信号，使其能够在多种体外和体内实验中实现高灵敏度的检测和成像。

化学结构与性质

CY5-NADH 的分子结构由两部分组成：一端是 NADH，另一端是 CY5 荧光基团。NADH 的核心结构包含腺嘌呤、核糖和烟酰胺，烟酰胺环的还原型氢原子使其具备电子供体特性，可参与生物氧化还原反应；CY5 则是一种长波长荧光染料，吸收峰通常在 650 nm 附近，发射峰约在 670 nm，具有高亮度、优良的光稳定性和良好的水溶性。偶联过程中，通常通过特定的功能基团（如 NHS 酯、Maleimide 或炔基）将 CY5 与 NADH 连接，同时尽量保持 NADH 的活性，使其在参与生化反应时不受干扰。

在溶液中，CY5-NADH 呈现良好的稳定性，能够在中性或弱碱性条件下保存较长时间。其荧光特性使其能够在荧光光谱仪、共聚焦显微镜以及流式细胞仪等多种检测平台上被准确检测，适合动态监测 NADH 的变化或定位研究。

生物学功能

NADH 是细胞能量代谢的核心分子，主要参与线粒体呼吸链的电子传递。CY5-NADH 保留了 NADH 的生物学功能，能够作为电子供体参与氧化还原反应。在代谢研究中，CY5-NADH 可用于：

监测代谢活性：通过测定细胞或组织中 CY5-NADH 的荧光强度变化，可以反映细胞能量代谢水平和氧化还原状态。

研究酶学反应：许多依赖 NADH 的酶（如乳酸脱氢酶、丙酮酸脱氢酶）可以与 CY5-NADH 结合，通过荧光变化实现酶动力学研究。

电子传递检测：在体外重建的线粒体或细胞裂解液体系中，CY5-NADH 可作为荧光底物检测电子传递链活性。

实验应用

荧光成像：CY5-NADH 的长波长发射特性可以有效避免自体荧光干扰，使其在活细胞荧光成像中表现出高信噪比，适用于线粒体定位、代谢状态监测及活细胞动态成像。

流式细胞分析：在流式细胞仪中，CY5-NADH 可用于区分不同代谢状态的细胞群体，通过荧光强度变化分析细胞活性及应激反应。

高通量筛选：CY5-NADH 可作为底物或探针，在药物筛选、酶活性检测或代谢相关生物传感器中应用，实现快速、高灵敏度的检测。

体外代谢模拟：通过 CY5-NADH 的荧光信号变化，可以在体外模拟呼吸链、发酵或光合电子传递过程，研究氧化还原平衡及代谢调控机制。

优势与特点

高灵敏度检测：CY5 的高亮度荧光信号，使 NADH 变化能够被微量检测，灵敏度显著高于传统吸光法测定 NADH。

动态监测能力：可实时观测 NADH 在生物体系中的代谢流动，实现动力学分析。

避免自体荧光干扰：CY5 的远红外荧光特性有效避开细胞自发荧光干扰，提高实验准确性。

多平台兼容：适用于荧光显微镜、流式细胞仪、荧光光谱仪及高通量板读设备，实验操作灵活。

注意事项

在使用 CY5-NADH 时，应注意以下问题：

避光操作：CY5 对光敏感，实验中应避免长时间暴露在强光下。

保存条件：建议在低温（-20℃ 或 4℃）、避光、干燥条件下保存，防止荧光强度下降或 NADH 氧化。

反应体系适配：在使用时应注意缓冲液 pH、金属离子及还原剂对 CY5-NADH 活性的影响。