中文名称:AF647-卵清蛋白
英文名称:AF647-OVA
用途:科研
状态:固体/粉末/溶液
保存:冷藏
供应:西安齐岳生物科技有限公司

AF647-OVA,即 Alexa Fluor 647 偶联卵清蛋白(Ovalbumin, OVA),是一种广泛应用于免疫学、细胞生物学及分子生物学研究的荧光标记蛋白。OVA 是来源于鸡蛋白的主要蛋白质,占蛋白总量的约 54%,具有高度纯化、低免疫原性和良好的溶解性,常用作模型抗原。而 Alexa Fluor 647(AF647)是一种光稳定性高、荧光强度高的远红光荧光染料,其最大激发波长约为 650 nm,最大发射波长约为 668 nm,具有良好的抗光漂白能力,适合多通道荧光检测。AF647-OVA 将 OVA 蛋白与 AF647 荧光染料偶联,使其在保持生物学活性的同时具备可视化的荧光特性,从而成为研究抗原摄取、处理和呈递的理想工具。
物理化学性质
AF647-OVA 为水溶性蛋白-荧光复合物,分子量约为 45 kDa(OVA 本身分子量约为 44 kDa,结合 AF647 后略有增加)。它在水溶液中呈稳定的溶液状态,可在 PBS(磷酸盐缓冲液)、生理盐水或细胞培养液中保持稳定。AF647 具有较高的量子产率和荧光强度,即便在长时间光照下也能维持较强的荧光信号,适合长时间成像实验。其荧光性质使其能够在激光共聚焦显微镜、流式细胞仪以及多光子显微镜等设备中检测。
主要用途
免疫学研究:AF647-OVA 常用作模型抗原,用于研究树突状细胞(DC)、巨噬细胞及 B 细胞的抗原摄取和呈递过程。通过荧光标记,研究者可以直观观察抗原在免疫细胞内的定位、处理和转运路径。
流式细胞分析(FACS):AF647-OVA 可用于检测细胞对外源抗原的摄取能力。利用 AF647 的远红荧光特性,可与其他常用荧光染料(如 FITC、PE、PerCP)进行多通道联合分析,避免光谱重叠,提高实验精度。
显微成像:在共聚焦显微镜或活体成像实验中,AF647-OVA 可用来追踪抗原在细胞或组织中的分布,帮助研究免疫反应的空间动态。其远红光发射可减少组织自发荧光的干扰,提高信噪比。
抗原递送研究:在疫苗开发和免疫递送研究中,AF647-OVA 可用于评估纳米载体、脂质体或其他递送系统对抗原的包载与递送效率。通过荧光定量,可以精确分析抗原在体内或体外的递送效果。
教育与教学:由于其易于观察和直观显示抗原分布,AF647-OVA 也常用于免疫学课程教学,帮助学生理解抗原-抗体反应和细胞免疫过程。
使用优势
高稳定性:AF647 对光照和温度具有良好的稳定性,适合长时间实验观察。
低细胞毒性:偶联后的 OVA 保留其生物活性,不影响细胞功能。
多通道兼容性:远红光发射可以与常见荧光染料联合使用,便于复杂实验设计。
精确追踪:能够在细胞和组织水平实现精确的抗原追踪,可进行定量分析。
使用注意事项
保存条件:AF647-OVA 应储存在 2–8℃ 避光保存,避免反复冻融。长期保存可在 −20℃ 下分装冻存。
溶液制备:使用前可在 PBS 或适当缓冲液中稀释,避免使用强酸、强碱或高浓度有机溶剂。
光敏感性:虽然 AF647 抗光漂白能力较强,但在显微镜观察时仍应尽量减少光照时间。
实验设计:在多通道实验中,应注意荧光重叠和滤光片设置,确保信号准确。
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