ATTO495-NHS，ATTO 495 N-羟基琥珀酰亚胺酯，合成步骤

英文名称：ATTO 495 NHS

中文名称：ATTO 495 N-羟基琥珀酰亚胺酯

二、分子概述

ATTO 495 NHS是一种绿色荧光染料，具有N-羟基琥珀酰亚胺（NHS）酯活性基团，可与含初级氨基（-NH₂）的生物分子形成稳定的共价酰胺键。该荧光染料激发波长约为495 nm，发射波长约为518 nm，呈明亮绿色荧光。ATTO 495 NHS具有较高量子产率、良好光稳定性和适中的水溶性，使其在蛋白质、抗体、多肽及核酸标记，以及荧光成像、多通道分析中得到广泛应用。

三、合成步骤

ATTO 495 NHS的合成主要包括三步：荧光染料骨架构建、羧基引入和NHS酯化活化。

1. 荧光染料骨架构建
   合成ATTO 495的核心结构通常采用芳香族缩合或偶联方法形成共轭体系，保证染料在可见光区域的激发和发射特性。通过选择适当的取代基，如甲氧基、羟基或烷氧基修饰，可以提高量子产率、增强光稳定性，同时改善水溶性和化学耐受性。骨架合成完成后，得到带有羧基前体的荧光染料分子，为后续活化做准备。

2. 羧基引入
   在染料骨架上引入羧基（-COOH）功能基团，使染料具有可与NHS酯化反应的活性位点。羧基可通过硝基还原、酯化后水解或芳香环上取代反应等方法引入。羧基不仅提供活性位点，还能在一定程度上调节分子水溶性和平衡疏水性。

3. NHS酯化活化
   将带羧基的ATTO 495染料溶解在干燥的有机溶剂中（如二氯甲烷、N,N-二甲基甲酰胺或DMSO），加入N-羟基琥珀酰亚胺（NHS）和碳二亚胺类活化剂（如DCC或EDC）。在温和条件下（一般室温或轻微搅拌），羧基与NHS生成活性NHS酯，从而形成ATTO 495 NHS。此步骤确保染料可与含氨基的生物分子共价结合。

4. 纯化与验证
   合成反应完成后，通过硅胶柱层析或高效液相色谱（HPLC）纯化产物，去除未反应的NHS、活化剂副产物及残留溶剂。纯化后的ATTO 495 NHS可通过质谱（MS）、核磁共振（NMR）以及荧光光谱验证分子结构、激发/发射波长及NHS活性。

四、应用说明

ATTO 495 NHS可用于蛋白质、抗体、多肽及核酸标记，适合免疫荧光、流式细胞、多通道成像及分子探针开发。其绿色发射波适合与蓝色、红色或近红外荧光染料组合，实现多重标记实验。通过NHS酯与氨基分子形成共价结合，可获得稳定、可追踪的荧光标记，适用于长期观察实验。

五、总结

ATTO 495 NHS是一种绿色荧光染料，通过NHS酯化实现与氨基化生物分子的共价标记。其合成步骤包括荧光骨架构建、羧基引入及NHS酯化活化，并通过纯化和验证确保活性和光学性能。ATTO 495 NHS凭借其光稳定性、化学活性和绿色荧光特性，广泛应用于生物分子标记、荧光成像和多通道分析实验。

纯度：95%+

性状：固体或液体

储藏条件：-20°C干燥避光保存

包装规格：50mg  100mg  250mg  500mg（按需提供）

厂家：齐岳生物

关于我们

齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务，如活性酯（NHS酯）、马来酰亚胺（MAL）、叠氮（N₃）、炔基（alkyne）等，便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合，实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外，齐岳生物还提供定制染料标记服务，包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物，满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。

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