CY5.5-L-Glutamic Acid，CY5.5标记L谷氨酸的合成步骤概述

CY5.5-L-谷氨酸是一种通过将氨基酸L-谷氨酸（L-Glutamic Acid）与近红外荧光染料CY5.5共价偶联得到的功能性标记物，应用于生物成像、药物递送和生物分子追踪等领域。其合成过程设计合理，确保标记效率与分子结构稳定性的同时，程度保留L-谷氨酸的生物活性。

1. 材料准备：

L-谷氨酸：手性氨基酸，含有α-氨基和两个羧基（α-羧基和侧链羧基）。

CY5.5-NHS酯：含有活性N-羟基琥珀酰亚胺酯的近红外荧光染料，具备高效与胺基反应的活性。

缓冲液：一般选用pH 8.0–8.5的碳酸盐缓冲液或PBS缓冲液，以保持反应条件的温和性。

有机碱：三乙胺（TEA）等，用于调节体系pH及促进反应。

2. 反应机理与连接位点选择：

L-谷氨酸中存在两个羧基和一个氨基，标记主要发生在氨基与CY5.5-NHS酯之间，通过酰胺键形成实现稳定偶联。一般选择α-氨基作为反应位点，因为侧链羧基若参与反应，则会影响分子功能及水溶性。为了避免羧基之间副反应，有时需对羧基进行保护。

3. 合成步骤概述：

（1）羧基保护（可选）：

为防止羧基参与副反应，L-谷氨酸的羧基常用酯化法进行保护（如甲酯或叔丁酯保护）。此步骤提高了氨基的反应选择性，保护基团在后续水解步骤中易于去除。

（2）偶联反应：

在有机碱（TEA）存在下，将保护后的L-谷氨酸溶解于缓冲液中，缓慢滴加CY5.5-NHS酯溶液（常用DMSO或DMF溶剂），室温条件下搅拌反应6–12小时。期间，通过NHS酯与α-氨基发生亲核取代反应，形成稳定的酰胺键。

（3）保护基去除（如适用）：

反应结束后，采用酸性条件（如TFA）去除羧基保护基团，恢复羧基的自由状态，确保终产物具备良好的生物活性及水溶性。

（4）纯化步骤：

采用反相高效液相色谱（RP-HPLC）分离纯化目标产物，利用紫外-可见及荧光检测定位产品峰。收集纯品后冻干得固体。

4. 质量控制：

通过质谱、核磁共振（NMR）、紫外-可见光谱和荧光光谱确认偶联成功及分子结构。测定产物的光学纯度、荧光特性及溶解性能，确保满足后续应用需求。

总结：

CY5.5-L-谷氨酸的合成设计注重保护基策略和偶联反应的选择性，通过温和条件下的NHS酯-胺反应实现高效标记。此方法保证了分子的结构完整和功能保留，使得该标记物在生物成像

产品名称：CY5.5-L-Glutamic Acid，CY5.5标记L谷氨酸

纯度：95%+

性状：固体或液体

储藏条件：-20°C干燥避光保存

包装规格：50mg  100mg  250mg  500mg（按需提供）

厂家：齐岳生物

关于我们

齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务，如活性酯（NHS酯）、马来酰亚胺（MAL）、叠氮（N₃）、炔基（alkyne）等，便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合，实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外，齐岳生物还提供定制染料标记服务，包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物，满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。

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