Cy5.5-Human IgG，CY5.5标记人免疫球蛋白G的合成过程研究

Cy5.5标记人免疫球蛋白G（Human IgG）是一种将近红外荧光染料Cy5.5共价结合于IgG分子的复合物，用于免疫检测、活体成像及药物递送等领域。合成过程中，保证标记效率、维持IgG的生物活性和结构完整性是核心研究内容。

合成过程关键步骤与研究内容

人IgG的结构与活性位点分析

IgG为四链结构（两条重链、两条轻链），含有丰富的赖氨酸残基的游离氨基（–NH2），为Cy5.5-NHS酯的共价结合提供主要反应位点。此外，IgG抗原结合区域及Fc段结构对功能保持极为关键，标记过程中需避免结构破坏。

染料活性化及溶解条件

Cy5.5一般以NHS酯活化形式出现，具有高亲电性。溶剂体系以PBS缓冲液（pH 7.4–8.0）为宜，兼顾IgG稳定性和标记反应效率。温和的溶液条件避免蛋白质变性。

反应比例优化

研究中重点优化Cy5.5-NHS与IgG的摩尔比，控制标记密度（degree of labeling，DOL）。过高的染料用量可能导致IgG结构紊乱和功能丧失，过低则荧光信号弱。实验通过梯度浓度体系筛选佳比例，通常为5:1至20:1。

反应时间与温度控制

在室温或4℃条件下，反应时间从30分钟到数小时不等，确保充分反应同时避免蛋白质降解。通过调整反应时间实现标记效率与蛋白质活性的平衡。

反应终止与去除自由染料

反应后加入氨基酸（如甘氨酸）中和未反应NHS酯，防止二次反应。通过透析、凝胶过滤色谱或超滤技术去除游离Cy5.5染料，确保产物纯净。

结构与功能评估

使用SDS-PAGE、紫外-可见光吸收及荧光光谱检测标记成功与纯度。结合免疫活性检测（如ELISA、抗原结合实验）确认标记后的IgG保持功能。动态光散射（DLS）检测颗粒大小，避免聚集。

标记过程的工艺研究

研究不同缓冲体系（PBS、碳酸氢盐缓冲液）、pH值和离子强度对标记效率和蛋白稳定性的影响。优化配比及反应条件，建立可重复的制备工艺。

产品名称：Cy5.5-Human IgG，CY5.5标记人免疫球蛋白G

纯度：95%+

性状：固体或液体

储藏条件：-20°C干燥避光保存

包装规格：50mg  100mg  250mg  500mg（按需提供）

厂家：齐岳生物

关于我们

齐岳生物供应近红外荧光花菁染料标记各种官能团的定制服务，如活性酯（NHS酯）、马来酰亚胺（MAL）、叠氮（N₃）、炔基（alkyne）等，便于与蛋白质、肽、多糖、抗体、寡核苷酸、纳米颗粒等共价偶联。可选择多种功能团与目标分子进行精准结合，实现对蛋白质、多肽、抗体、核酸或纳米材料的荧光修饰。此外，齐岳生物还提供定制染料标记服务，包括肽类、蛋白类、小分子、糖类等不同类型标的物，满足用户在科研、成像等多方面的个性化应用。

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