英文名 Tyramide alkyne
CAS号 2230051-33-7
分子量 231.29
分子式 C14H17NO2
熔点 N/A
Tyramide alkyne 是一种功能性化学试剂,属于酚胺类化合物衍生物,带有末端炔基(alkyne)官能团。其分子结构中包含一个酚羟基与氨基的酚胺核心,同时通过炔基修饰,实现与叠氮(azide)化合物的点击化学反应能力。
化学结构与性质
Tyramide alkyne 的分子结构兼具酚胺的生物活性与炔基的化学活性。酚羟基可在酪氨酸残基的存在下,通过辣根过氧化物酶(HRP)催化的氧化反应形成活性自由基,随后能够共价附着于蛋白质或组织中的邻近分子,实现信号放大标记。这种特性使其在高灵敏度的生物标记体系中非常有用。末端炔基则赋予其与叠氮类化合物通过铜催化或铜自由条件下的“点击化学”发生选择性共价连接的能力。
Tyramide alkyne 在常规储存条件下为固体或粉末状,易溶于有机溶剂如 DMSO 或 DMF。其化学性质稳定,但应避免强氧化剂、高温和光照,以防止炔基的降解或聚合反应。
应用领域
增强型免疫组织化学 (TSA, Tyramide Signal Amplification)
Tyramide alkyne 是 TSA 技术中的关键试剂。在该方法中,HRP 与目标抗体结合后,通过催化酚胺的氧化反应,使 Tyramide alkyne 生成自由基,快速附着在邻近的酪氨酸残基上,实现信号放大。由于炔基的存在,标记后的分子可进一步与荧光染料或生物素等分子通过点击反应结合,从而实现多重标记或定量检测。这一策略显著提升了低丰度蛋白检测的灵敏度,是现代免疫组化和原位杂交实验的重要工具。
化学标记与荧光探针构建
Tyramide alkyne 的末端炔基允许与 azide 修饰的荧光染料(如 Cy3-azide、Cy5-azide)通过 Huisgen 1,3-偶极环加成反应生成稳定的共价键,从而构建高特异性荧光探针。这种标记方式可以避免直接修饰蛋白质可能引起的功能损失,同时提高探针的定位精度和信号强度。
多重分子成像
由于点击化学的高度选择性,Tyramide alkyne 可以与多种不同叠氮功能化分子进行反应,从而在同一样品中实现多通道标记和成像。这在空间定位蛋白质复合物、细胞器追踪以及生物组织三维成像中具有独特优势。
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