英文名称: Alexa Fluor 647 maleimide
MF: C41H50N4O15S4
MW: 967.1
CAS: 1825332-75-9
AF 647 Maleimide 是一种荧光染料衍生物,由 Alexa Fluor 647 核心荧光团和 Maleimide 功能基团组成。Alexa Fluor 647 属于长波长红色荧光染料,具有高光稳定性、高荧光量子产率和较窄的发射光谱。Maleimide 官能团能够与巯基(–SH)形成稳定的硫醚共价键,适合用于蛋白质、肽或其他含半胱氨酸的分子特异性标记。该染料水溶性良好,并可在缓冲体系中保持稳定。
光学性质
Alexa Fluor 647 部分的吸收峰约为650 nm,发射峰约为668 nm,红色荧光亮度高,光衰减慢,适合多色荧光实验和长时间成像。长波长发射减少了自体荧光干扰,提高检测灵敏度和信噪比。
化学活性与反应特性
Maleimide 末端是 AF 647 Maleimide 的关键反应位点,可与蛋白质或多肽的自由巯基发生 Michael 加成反应,生成稳定的共价硫醚键。反应条件温和,通常在 pH 6.5–7.5 的缓冲体系中进行最佳,以避免 Maleimide 与胺基的非特异性反应。该反应选择性高、效率高,非常适合在生物体系或活细胞条件下进行标记。
应用领域
蛋白质及多肽标记:可用于抗体、酶、蛋白质或多肽的巯基标记,实现荧光可视化和定量分析。
活细胞追踪与成像:AF 647 Maleimide 可标记细胞内巯基蛋白,用于长波长荧光成像、细胞跟踪和亚细胞结构可视化。
多色荧光实验:与其他不同波长的荧光染料联合使用,可进行多色共定位实验和荧光共聚焦成像。
生物传感器和探针开发:可将染料偶联到巯基修饰的分子或纳米载体,实现高灵敏度检测和荧光响应。
储存与注意事项
AF 647 Maleimide 应避光、低温(-20°C)干燥保存,避免潮解和水解。使用前应溶解于干燥缓冲液中,避免长时间在水中放置,以保证 Maleimide 的活性和荧光稳定性。
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