常用名 生物素-HPDP
英文名 Biotin HPDP
CAS号 129179-83-5
分子量 539.78
密度 1.3±0.1 g/cm3
沸点 876.0±65.0 °C at 760 mmHg
分子式 C24H37N5O3S3
闪点 483.6±34.3 °C
Biotin-HPDP(全称:N-[6-(Biotinamido)hexyl]-3′-(2′-pyridyldithio)propionamide,CAS:129179-83-5)是一种常用的 可裂解型生物素标记试剂。其分子由三部分组成:
生物素(Biotin)基团:负责与亲和素(Avidin/Streptavidin/NeutrAvidin)特异性结合,形成高亲和力的分子识别体系。
HPDP 连接臂:即吡啶基二硫键结构,赋予该分子“可裂解性”。该二硫键在还原剂(如 DTT、TCEP)作用下可被断裂,从而释放结合的生物素。
六碳链间隔臂:保证生物素与靶标分子保持适当的空间距离,减少空间位阻影响,有利于后续亲和结合和检测。
Biotin-HPDP 的关键特征在于 可裂解的二硫键(–S–S–),与一般稳定的生物素化试剂不同,它允许研究人员在结合和纯化后,通过温和的还原条件释放目标分子。这一特性在 可逆标记、亲和纯化和可控释放系统 中尤为重要。
其典型应用包括:
巯基修饰反应:HPDP 部分可选择性地与蛋白质或小分子上的 自由巯基(–SH) 反应,形成稳定的二硫键结合。
可逆生物素化:通过二硫键连接的生物素可以在需要时通过还原条件断裂,实现目标分子的“去生物素化”,避免不可逆结合带来的限制。
蛋白质富集与纯化:利用生物素-亲和素的超高亲和力,Biotin-HPDP 标记的分子可被高效富集、检测或分离,而后再通过还原性洗脱得到纯化目标。
分子探针设计:适用于构建可控释放型探针,广泛用于信号检测、诊断和分子成像研究。
核酸修饰:可用于修饰带巯基修饰的寡核苷酸,从而实现可裂解型核酸生物素化探针。
Biotin-HPDP 在生物医学中的应用价值非常突出:
在 蛋白质组学研究 中,可用于巯基修饰蛋白的富集与鉴定。
在 分子诊断 中,利用其可裂解特性构建高灵敏度的可控检测平台。
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