FITC-HSA5000,异硫氰酸荧光素标记人血清白蛋白5000的偶联反应化学特点
FITC-HSA5000 是通过异硫氰酸荧光素(Fluorescein Isothiocyanate, FITC)与分子量约为5000 Da的人血清白蛋白(Human Serum Albumin, HSA,低聚或酶解片段形式)偶联形成的荧光标记蛋白衍生物。HSA5000 保留了血清白蛋白的基本骨架和可溶性特征,但相对于全长 HSA,其分子量降低,可用于构建小分子载体、药物递送体系以及荧光示踪实验。
基本化学结构
FITC-HSA5000 由三个主要组成部分构成:HSA5000 主链:由肽链片段或酶解片段组成,保留赖氨酸、组氨酸、丝氨酸及天冬氨酸等氨基酸残基的功能性侧链。这些残基为偶联和功能化提供了可利用位点,尤其是赖氨酸的ε-氨基是 FITC 偶联的主要反应位点。
Ahx 或短链间隔(可选):在某些偶联体系中,引入短链间隔如6-氨己酸(Ahx)可以增加 FITC 荧光团与蛋白主链的空间分离,减少空间阻碍对蛋白构象或结合能力的影响,确保荧光性能与生物活性兼顾。
FITC 荧光团:FITC 通过异硫氰酸基(–N=C=S)与 HSA5000 的伯胺或间隔链末端氨基形成稳定的氨基异硫氰酸酯(thiourea)键。FITC 的苯并异硫氰酸结构提供可观的电子共轭体系,使其在激发光约495 nm下发射绿色荧光(约520 nm),实现可视化追踪与定量分析。
偶联反应化学特点
FITC 与 HSA5000 偶联属于典型的亲核加成反应:FITC 的异硫氰酸碳原子带部分正电荷,对亲核氨基具有高度反应性。
HSA5000 的赖氨酸ε-氨基或间隔链末端伯胺/仲胺攻击 FITC 的异硫氰酸碳,形成共价氨基异硫氰酸酯键,偶联过程中保持蛋白骨架完整。
反应温和,通常在轻碱性缓冲液(pH 8–9)和室温条件下进行,以保证蛋白质构象稳定和荧光团不受破坏。
空间结构与分子构象
FITC-HSA5000 的化学结构可视为线性或轻微折叠的低分子量肽链上,沿链分布的荧光标记点。荧光团通过氨基异硫氰酸酯键与蛋白连接,可通过柔性间隔链(如Ahx)与肽链保持一定距离,从而减少空间阻碍。HSA5000 保留部分疏水性内核和亲水性表面,形成水溶性可分散的结构,有利于在生物体系中保持稳定溶解性。化学稳定性与功能性
氨基异硫氰酸酯键稳定性:FITC 与 HSA5000 的共价键在中性或弱碱性条件下稳定,不易水解,保证荧光信号持续。
蛋白骨架稳定性:低分子量 HSA5000 保留部分二级结构和可溶性特征,在偶联过程中不易发生不可逆折叠或聚集。
荧光性能:FITC 的芳香族体系和共轭双键结构保持完好,实现高灵敏度、线性荧光响应,适合定量分析与示踪研究。
产品名称:FITC-HSA5000
纯度:95%+
性状:固体或液体
储藏条件:-20°C干燥避光保存
包装规格:50mg 100mg 250mg 500mg(按需提供)
厂家:齐岳生物
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仅供科研,不能用于人体实验AXC.2025.09